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Dojindo Kit-NH2生物素標(biāo)記試劑盒

簡要描述:品名:Dojindo Kit-NH2生物素標(biāo)記試劑盒
貨號:LK03
規(guī)格型號:3samples/盒

  • 產(chǎn)品型號:LK03
  • 廠商性質(zhì):代理商
  • 更新時間:2021-03-29
  • 訪  問  量:3719
詳細(xì)介紹
品牌其他品牌供貨周期現(xiàn)貨
應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

品名:Dojindo Kit-NH2生物素標(biāo)記試劑盒
貨號:LK03

規(guī)格型號:3samples/盒

產(chǎn)品特性
整個標(biāo)記過程僅需1個小時
整個標(biāo)記過程在1支過濾管中進(jìn)行
熒光標(biāo)記抗體回收率高
適用于50-200 μg的IgG

Dojindo Biotin Labeling Kit-NH2生物素標(biāo)記試劑盒 產(chǎn)品描述
該試劑盒主要用于制備生物素標(biāo)記的蛋白質(zhì),用于酶免疫分析(EIA)。NH2-reactive biotin是試劑盒的成分之一,它含有琥珀酰亞胺基(NHS),能與蛋白質(zhì)或者其它分子的氨基反應(yīng)。該試劑盒中包含了標(biāo)記所需的全部試劑,標(biāo)記過程十分 簡便。只需將NH2-reactive biotin加入到IgG溶液中,37℃培養(yǎng)10分鐘即可。每個IgG分子平均能夠和5-8個生物素分子結(jié)合。過量的生物素分子能夠使用過濾管將其除去。
Biotin Labeling Kit-NH2 試劑盒內(nèi)容
- NH2-Reactive Biotin .......................... 3 tubes
- WS Buffer ......................................... 4 ml x 1
- Reaction Buffer ................................. 500 μl x 1
- Filtration Tube .................................. 3 tubes

 操作步驟
(1)將100 μl WS buffer以及含有100 μg IgG的樣品溶液加入到過濾管中。a)
(2)8,000-10,000 g離心10分鐘。b)
(3)將10 μl DMSO加入到NH2-reactive biotin中并用移液器吹打使其溶解。c)
(4)將100 μl Reaction buffer以及8 μl NH2-reactive biotin溶液加入到過濾管中,吹打使其混合。d)
(5)將過濾管放入培養(yǎng)箱中,37℃培養(yǎng)10分鐘。
(6)將100 μl WS buffer加入到過濾管中,8,000-10,000 g離心10分鐘,b)除去濾液。
(7)將200 μl WS buffer加入到過濾管中,8,000-10,000 g離心10分鐘,b)重復(fù)該步驟一次。
(8)將200 μl WS buffer加入到過濾管中吹打10-15次來回收標(biāo)記產(chǎn)物。e)將該溶液轉(zhuǎn)移到0.5 ml試管中,在0-5℃下保存。
  a)樣品溶液的體積不應(yīng)超過100 μl。如果抗體濃度低于1 mg/ml,重復(fù)步驟1和2直至總的IgG聚積量達(dá)到100 μg。如果聚積過程中濾液的體積超過400 μl,則在進(jìn)行后續(xù)的離心操作前應(yīng)除去濾液。
  b)如果溶液在離心后仍然殘留在膜上,可以再離心5分鐘或者適當(dāng)增加轉(zhuǎn)速。
  c)NH2-reactive biotin在管子的底部,向管底加入10 μl DMSO,吹打數(shù)次使其溶解。
  d)如果IgG的量為200 μg,在步驟4時加入所有的NH2-reactive biotin溶液。
  e)并不一定要使用WS buffer來回收標(biāo)記產(chǎn)物,可以選擇任何適合于該實驗的緩沖液來替代。

注意事項

用該試劑盒標(biāo)記的蛋白質(zhì)的分子量要>50,000。
在標(biāo)記過程中,IgG或者biotin-IgG標(biāo)記物始終在Filtration tube的濾膜上。
如果IgG溶液中含有分子量>10,000的其他蛋白質(zhì),如BSA或明膠時,在使用該試劑盒標(biāo)記前,先要純化IgG溶液。IgG溶液能夠用IgG Purification Kits(不包含于本試劑盒中)來純化。
如果IgG溶液含有小的不溶物,離心后取上清液來進(jìn)行標(biāo)記。
如果長時間不使用,建議您把試劑盒中的標(biāo)記試劑NH2-reactive biotin放在-20℃冰箱中保存,不需要充氮氣,可以更好地保持標(biāo)記試劑的活性,但請不要把其它試劑和過濾管放到-20℃冰箱中,仍請放在0-5℃冰箱中保存。

品名:Dojindo Kit-NH2生物素標(biāo)記試劑盒
貨號:LK03

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