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淋巴細(xì)胞分離液的9大注意事項(xiàng)

更新時(shí)間:2021-05-14 點(diǎn)擊次數(shù):2483
   淋巴細(xì)胞分離液是一種用于分離人外周血淋巴細(xì)胞的無(wú)菌、低內(nèi)毒素水平的密度梯度分離液。其分離原理是根據(jù)血細(xì)胞的密度差異,通過(guò)離心使一定密度的細(xì)胞按相應(yīng)密度梯度分布,從而將淋巴細(xì)胞從人外周血或臍帶血中分離出來(lái)。
  使用注意事項(xiàng):
  (1)開(kāi)封前顛倒混勻,本分離液為無(wú)菌產(chǎn)品,為延長(zhǎng)分離液保存時(shí)間,請(qǐng)?jiān)跓o(wú)菌條件下啟封,避免微生物污染。
  (2)分離液使用時(shí)應(yīng)始終保持室溫,如室內(nèi)溫度較低,可將分離液預(yù)熱。4℃或者是溫度較低的條件下離心,可能會(huì)導(dǎo)致白膜層中紅細(xì)胞污染加重。
 ?。?)血液樣本最好為新鮮抗凝血,為保持淋巴細(xì)胞的活性,應(yīng)避免冷凍和冷藏。
 ?。?)稀釋血液或洗滌細(xì)胞,不可使用含Ca、Mg離子的緩沖液及培養(yǎng)液,其成分會(huì)導(dǎo)致血細(xì)胞凝集,大大降低細(xì)胞得率及純度。
 ?。?)部分塑料制品因其帶有的靜電作用,可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞掛壁,影響分離效果。
 ?。?)血液樣本的粘稠度或者是溫度差異,可能會(huì)影響分離效果,可以調(diào)節(jié)離心轉(zhuǎn)數(shù)和離心時(shí)間,摸索最佳的分離條件。
 ?。?)吸取過(guò)多的淋巴細(xì)胞層及分離液層會(huì)導(dǎo)致分離液交界處的粒細(xì)胞被吸出從而使混雜的粒細(xì)胞數(shù)量增加;吸取過(guò)多的血漿層可能會(huì)導(dǎo)致淋巴細(xì)胞中血漿蛋白及血小板污染。
 ?。?)如果要進(jìn)一步對(duì)分離的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),那在收集血液和分離過(guò)程中,注意無(wú)菌操作,避免微生物污染。
 ?。?)不同動(dòng)物血液在不同比重分離液中的細(xì)胞離散系數(shù)及細(xì)胞帶電不同,用戶(hù)在制定分離液時(shí)應(yīng)提供所需分離液的比重、動(dòng)物種屬及被分離細(xì)胞的名稱(chēng)。
 

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