亚洲综合一区二区三区无码,野花社区日本在线观看免费观看3,亚洲小说区图片区另类春色,日韩人妻无码一区二区三区综合部

服務(wù)熱線

15021010459
技術(shù)文章
當(dāng)前位置:主頁 > 技術(shù)文章 > ProteanFect:小鼠原代T細(xì)胞從提取到轉(zhuǎn)染全流程攻略

ProteanFect:小鼠原代T細(xì)胞從提取到轉(zhuǎn)染全流程攻略

更新時間:2025-01-15 點(diǎn)擊次數(shù):18
小鼠原代T細(xì)胞一般從脾臟組織中得到,包括脾臟研磨、細(xì)胞分離、純化T細(xì)胞等步驟。以下是常用的小鼠原代T細(xì)胞提取流程:

實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備

  1. 材料與試劑:新鮮小鼠脾臟、PBS緩沖液、無菌手術(shù)器械(剪刀、鑷子等)、細(xì)胞過濾器、CD4/CD8磁珠分選試劑(如需純化特定亞型),或陰選的方式去除B細(xì)胞、單核細(xì)胞、NK細(xì)胞的磁珠分選試劑,RPMI-1640培養(yǎng)基,人白介素2,胎牛血清,抗生素(如青霉素-鏈霉素)。
  2. 設(shè)備:無菌操作臺、離心機(jī)、磁力分選架。

從小鼠脾臟獲取單細(xì)胞懸液

  1. 小鼠頸椎脫臼處死,75%乙醇浸泡5分鐘,取出小鼠置于無菌操作臺上,左腹側(cè)朝上。
  2. 在小鼠左腹側(cè)中部剪開小口,撕開皮膚暴露腹壁,可見紅色長條狀脾臟。
  3. 在脾臟下側(cè)提起腹膜,剪開后上翻,暴露脾臟,用鑷子提起脾臟,眼科剪分離下面的結(jié)締組織,取出脾臟,剝?nèi)ブ車慕Y(jié)締組織,期間用含有2%FBS的PBS溶液保持脾臟濕潤。
  4. 將脾臟放于70UM過濾網(wǎng)中,用注射器針芯輕輕研壓脾臟,用含2%FBS的PBS沖洗過濾網(wǎng),獲細(xì)胞懸液。
  5. 300G離心5分鐘,收集細(xì)胞沉淀,然后加入紅細(xì)胞裂解液裂解,將紅細(xì)胞充分裂解,收集白細(xì)胞。

從單細(xì)胞懸液中分離小鼠原代T細(xì)胞

  1. 全T細(xì)胞分離:利用陰選的方式去除B細(xì)胞、單核細(xì)胞、NK細(xì)胞等,按照分選試劑盒的說明書進(jìn)行。
  2. 亞群分離(如需要CD4+或CD8+ T細(xì)胞):
    • 使用CD4或CD8磁珠(如MACS磁珠)分選獲得特定T細(xì)胞亞群。
    • 將磁珠標(biāo)記的細(xì)胞懸液置于磁性分選裝置中,分離出目標(biāo)T細(xì)胞亞群。

培養(yǎng)與檢測

  1. 將分離的T細(xì)胞重懸于含10%胎牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)基中,并加入抗生素與人白介素2。
  2. 細(xì)胞密度一般控制在1-2×10^6 CELLS/ML,放入37°C、5% CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

轉(zhuǎn)染

西湖凝聚體推出針對小鼠原代T的PT03 PROTEANFECT MAX小鼠原代T細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒。使用ProteanFect Max遞送EGFP mRNA至小鼠原代T細(xì)胞,實(shí)現(xiàn)高效表達(dá)。

企業(yè)介紹

華雅思創(chuàng)生物®專注于提供CGT、分子診斷和先進(jìn)醫(yī)療的生物試劑和醫(yī)療耗材產(chǎn)品,服務(wù)客戶遍及細(xì)胞治療、疫苗抗體、醫(yī)療診斷、腦科學(xué)、合成生物、長壽研究和醫(yī)美保健等領(lǐng)域。"買試劑,找華雅",華雅思創(chuàng)生物®憑借深厚的技術(shù)實(shí)力和嚴(yán)格的質(zhì)量控制體系,已成為眾多科研機(jī)構(gòu)和生物制藥企業(yè)的首·選供應(yīng)商。


2025 版權(quán)所有 © 重慶市華雅干細(xì)胞技術(shù)有限公司  備案號:渝ICP備14000349號-4 sitemap.xml 管理登陸 技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)

地址:重慶市江北區(qū)金渝大道153號8棟20-14 傳真:023-63419626 郵件:sales@ys-bio.com

重慶市華雅干細(xì)胞技術(shù)有限公司主要經(jīng)營干細(xì)胞研究 干細(xì)胞治療產(chǎn)品 生物試劑 實(shí)驗(yàn)耗材 藥物研發(fā)等產(chǎn)品。

關(guān)注我們

服務(wù)熱線

400-021-2200

掃一掃,關(guān)注我們

男女男精品免费视频网站| 亚洲av不卡一区二区三区 | 日本精品一区二区三区在线视频| 欧美日韩视频无码一区二区三| 国产成人无码A区在线观看导航| 亚洲综合无码AV一区二区| free紧videoxx粗又长| 亚洲爆乳成人无码aaa片漫画| 少妇被黑人4p到惨叫在线观看| 人妻av无码专区久久绿巨人| 国产又爽又黄又爽又刺激| 国产啪亚洲国产精品无码| 人妻无码久久中文字幕专区| 男女猛烈激情XX00免费视频| 精品无码亚洲一区二区三区毛 | 人妻夜夜爽天天爽| 久久精品中文字幕第一页| 亚洲精品久久av无码蜜桃| 亚洲av中文无码字幕色三| 无人高清视频免费观看在线| 美女又黄又免费的视频| 亚洲综合久久日日躁综合| 亚洲中文字幕无码av永久| 亚洲A∨无码精品色午夜| 亚洲综合小说另类图片动图| 精品2022露脸国产偷人在视频 | 亚洲精品人成影精品院| 亚洲欧洲日产国码v网址| 人妻少妇69式99偷拍| 久久久无码中文字幕久...| 午夜性刺激免费看视频 | 亚洲国产精品一区二区美利坚| 亚洲色在线无码国产精品不卡| 欧美日韩一区二区三区自拍 | 无码熟熟妇丰满人妻啪啪| 亚洲午夜av久久久精品影院| 不卡无码人妻一区三区音频| 欧美日韩亚洲国内综合网| 一进去一爽又粗又大| 国产风流老太婆大bbbhd视频| 欧美亚洲国产精品久久高清|